企业等级: | 普通会员 |
经营模式: | 经销批发 |
所在地区: | 湖北 武汉 |
联系卖家: | 黄经理 先生 |
手机号码: | 15002729010 |
公司官网: | www.neweastbio.... |
公司地址: | 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号光谷生物城B3-3栋3楼 |
发布时间:2022-08-03 01:18:19
对于生长的***培养液中的细胞,首先移除培养基,然后加入0.1M HCl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解;如果裂解不充分,接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心,收集上清直接用于实验。临用前在0.1M HCl中加入0.1%至1%浓度的Triton-x 100可增强细胞和***裂解。在这个浓度范围内,去污剂并不干扰试验的结合部位,但是会适度的增加光密度值。含有Triton的样品需利用标准曲线估计浓度,为了较精l确的测定,标准曲线需以相同方式稀释。取1 mL细胞培养上清加入10μL浓盐酸,600g离心力于室温离心,上清液直接用于实验测定分析。
武汉纽斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美国生命科学***供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA***盒、蛋白等,与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和***等客户建立了长期稳定的合作关系,产品销往世界。
***准备
非乙酰化cGMP标准品将5000 pmol/mL cGMP标准品溶液平衡至室温。从#1至#7标记六只洁净试管。移取475μL 0.1M HCl到#1号试管,400μL到#2至#7号试管。加入25μL 5000 pmol/mL cGMP标准品到#1管中,剧烈涡旋震荡。从#1管中取出100μL溶液至#2管中,涡旋震荡。以此类推,重复上步操作,梯度稀释至#7管。
经以上操作,#1至#6管中cGMP标准品浓度分别为250,50,10,2,0.4,0.08和0.016 pmol/mL(详见cGMP加样表)。稀释过的标准品需在30分钟内使用。
标记一只试管作为无标准品空白对照(NSB)。移取600μL 0.1M HCl到NSB管中。
洗涤液将15 mL 10×洗涤液储液加到135 mL去离子水中,稀释成工作液。稀释液可在室温保存至***盒有效期限,或者3个月。
洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
底物是光敏感的,要在临用前现配。
检测前,要打开酶l标仪,使之稳定10分钟以上。
底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
待检样品要澄清,否则会影响结果。
温浴时间应遵守***盒规定。
应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。
对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
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