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cGMP antibody了解更多「多图」

发布时间:2022-06-20 00:47:08        














结果计算

样品中cAMP浓度有多种计算方法。X轴表示cAMP标准品浓度,Y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。

1 样品和标准品的净光密度(OD)平均值的计算:

净OD平均值 = OD平均值 - NSB孔OD平均值

2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(B0孔)的百分比,计算公式 如下:

百分比值 = (净OD平均值/ B0孔OD平均值)×100

3 绘制净OD平均值或百分比值对cAMP标准品浓度的Logit-Log曲线。通过插值即可得到样品中cAMP浓度。






因此为筛选出腺苷酸环化酶的激l活剂或磷酸二酯酶的***l剂,需要一个高敏感度、特异性的、可重复的方案用于检测cGMP的含量。考虑到大分子的化合物可能存在较弱的影响,这一个初筛是有必要的。

目前商业化提供的一些cGMP检测***盒主要使用的是非亲和纯化的cGMP多克l隆抗l体。尽管据称有特异性,但这些多克l隆抗cGMP抗l体与cAMP和GTP呈现一定程度的交叉反应。且在大多数细胞类型中,cGMP含量低于cAMP 100倍。


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酶标记抗l体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗l体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗l体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。


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