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发布时间:2022-04-14 14:40:09
ELISA(酶联免疫吸附剂测定)一般指酶联免疫吸附剂测定酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA或ELASA)指将可溶性的抗原或抗体结合到polystyrene等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验,本词条从定义、基本原理、分类方法、操作要点等方面对其进行了详细介绍。
常用的ELISA可以分为以下五大类:①直接ELISA;②间接ELISA;③夹心ELISA;④竞争ELISA;⑤竞争抑制ELISA。其他的ELISA都隶属于这五类ELISA或由这五类ELISA组合衍生。
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ELISA操作步骤复杂,影响反应因素较多。
测定大分子量物质的夹心法ELISA,标准曲线的范围一般较宽,曲线ZUI高点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数值,以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈S形,其头、尾部曲线趋于平坦,中央较呈直线的部分是ZUI理想的检测区域。
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。
影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量的保证才能充分发挥其方法学的优点。
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