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黄经理 先生
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发布时间:2022-02-22 04:57:29
阳性对照和阴性对照的体外GTPγS/ GDP蛋白质上样量
注意:体内细胞刺激将激l活可用Arf 6的大约10%,而体外GTPγS蛋白负载将激l活Arf 6的将近90%。
1,将0.5 ml每种细胞提取物等分到两个微量离心管中(或使用1 μg纯化的Arf 6蛋白)。
2,向每个试管中加入20 μl 0.5 M EDTA(终浓度为20 mM)。
3,将5 μl 100 XGTPγS(至100 μM,终浓度)加到一个试管中(阳性对照)。
4,在第二个试管中加入5 μl 100 X GDP(至1 mM,终浓度)(阴性对照)。
5,在搅拌下将试管在30°C孵育30分钟。
6,通过将试管放在冰上并添加32.5 μl 1 M MgCl2(至60 mM,终浓度)来停止加载。
***符号:RAB11
说明:抗活性Rab11小鼠单克l隆抗l体
背景:Rab系列的小GTP酶是控制膜运输的机械的关键要素。 Rab11已显示可控制通过回收内体的运输。
免l疫原:活性Rab11的重组全长蛋白
应用范围:IP,IHC
推荐的稀释液:IP:1μg,用于1?2 mg总细胞蛋白
IHC:1:50?100稀释
浓度:1 mg / ml
格式:液体
同种型:IgG2b
纯度:从腹l水中纯化
存储缓冲区:
防腐剂:否
成分:PBS(不含Mg2 +和Ca2 +),pH 7.4、150 mM N***,50%甘油
种属反应性:抗活性Rab11抗l体识别来自脊椎动物的活性Rab11。
储存条件:储存于-20°C。 避免***/解冻周期
Arl1激l活试验。纯化的GST标记的Arl1蛋白用抗活性Arl1单克l隆抗l体(Cat。#26924)用GDP(车道1)或GTPγS(车道2)处理后,用抗Arl1单克l隆抗l体(Cat)进行印迹。#26056年)。显示Arl1蛋白输入控制在底部面板中。
产品描述
Arf样蛋白1(Arl1)是调节性gtpase家族中的一员,位于Ras中GTPases的超家族,在真核生物中具有高度保守的同源***。Arl1至关重要用于果蝇和秀丽隐杆线虫的早期胚胎发育。Arl1在一级序列,细胞位置和功能(膜交通的调节)到Arf1–6甚至共享几个共同的有约束力的合作伙伴。除了在膜交通中的作用高尔基/跨高尔基网络,有报道表明Arl1可能在离子稳态中起作用酵母。
目前还没有直接测定Arl1-gtpase活性的方法。NewEast Biosciences Arl1激l活检测***盒是基于特定构型的单克l隆抗l体特异性识别Arl1 GTP,但不识别Arl1 GDP的抗l体。鉴于单克l隆抗l体对其抗原,活化试验可在短时间内进行。这个分析结果可靠,重现性一致。
一系列结构多样的配体,从光子到大肽,激l活GPCRs来激发它们的生理功能。配体结合的GPCRs,反过来,起到鸟呤核苷酸交换的作用Gβγ存在下Gα亚基上的GDP与GTP交换的催化因子,导致Gα亚单位与Gβγ二聚体分离形成两个功能单元(Gα和Gβγ)。Gα和Gβγ亚单位都向各种细胞信号通路发出信号。根据顺序与功能同源,G蛋白分为四个家族:Gs,Gi、Gq和G12。增加这些G蛋白的效应器和相互作用蛋白的数量已经被鉴定,生理上G蛋白参与的过程正在增殖。
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