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联系卖家: | 黄经理 先生 |
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公司官网: | www.neweastbio.... |
公司地址: | 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号光谷生物城B3-3栋3楼 |
发布时间:2021-11-14 13:09:07
这些抗Arf 6-GTP单克l隆抗l体还可用于通过免l疫***化学监测细胞和***中Arf 6的激l活。
NewEast Biosciences Arf6激l活测定***盒提供了一种简单且快速的方法来监测Arf 6的激l活。每个***盒均提供足够的量以执行20个测定。
NewEast Biosciences Arf 6激l活检测***盒基于特定于配置的抗Arf 6-GTP单克l隆抗l体,可从细胞提取物或体外载有GTPγS的Arf 6激l活检测方法来测量活性Arf 6-GTP水平。 简而言之,抗活性的Arf 6小鼠单克l隆抗l体将与含有Arf 6-GTP的细胞裂解液一起孵育。 然后,结合的活性Arf 6将被蛋白A / G琼脂糖拉低。 分别使用抗Arf 6兔多克l隆抗l体通过免l疫印迹分析检测沉淀的活性Arf 6。
1.抗活性的Arl1,小鼠单克l隆抗l体(货号26924):一小瓶–溶于pH 7.4的PBS中的22 μL(1mg / ml),含有50%甘油和0.05%叠氮l化钠。该抗l体特异性识别所有脊椎动物的Arl1-GTP。
2.蛋白A / G琼脂糖(目录号30301):一小瓶– 400 μL 50%浆液。
3. 5X测定/裂解缓冲液(目录号30302):一瓶– 30 mL的250 mM Tris-HCl,pH 8,750mM N***,50 mM MgCl2,5 mM EDTA,5%Triton X-100。
4.抗Arl1,小鼠单克l隆抗l体(目录号26056):一小瓶– 100 μL(1 mg / ml)
pH 7.4的PBS中含有50%的甘油。
5. 100 XGTPγS(货号30303):1瓶– 100 μl,10 mM,使用5 μLGTPγSGTP标记的0.5 mL细胞裂解物。
6. 100 X GDP(产品目录号30304):一个样品瓶– 100 μl,100 mM,使用5 μL GDP
GDP标记的0.5 mL细胞裂解物。
1.刺激的和非刺激的细胞裂解液
2.蛋白酶***l剂
3. 4°C管摇杆或摇床
4. 0.5 M EDTA,pH8.0
5. 1 M氯化镁
6. 2倍还原SDS-PAGE样品缓冲液
7.电泳和免l疫印迹系统
8.免l疫印迹洗涤缓冲液,例如TBST(10 mM Tris-HCl,pH 7.4,0.15 M N***,0.05%Tween-20)
9.免l疫印迹封闭缓冲液(TBST包含5%脱脂奶粉或3%BSA)
10. PVDF或硝l酸纤维素膜
11.二抗
12. ECL检测***
?1X测定/裂解缓冲液:短暂混合5X储备液,并在去离子水中稀释至1X。 在使用前,添加蛋白酶***l剂,例如1 mM PMSF,10 μg / mL亮肽素和10 μg / mL抑肽酶。
检测原理
武汉纽斯特生物技术有限公司的Cd***2活性检测***盒主要是利用识别蛋白特异形态的Cd***2-GTP单克l隆抗l体特异性的去检测细胞提取物或者体外的(样品需要进行GTPγS活化处理)活性Cd***2-GTP的水平。简言之,特异性识别Cd***2活化构象的鼠单克l隆抗l体可以特异性结合细胞裂解液中的Cd***2-GTP活性蛋白,然后利用protein A/G将抗原抗l体的结合物吸附下来,再利用特异性识别Cd***2活化构象的兔多克l隆抗l体进行免l疫印迹分析进行检测。
Gα13活化试验。MEF细胞分别用LPA(第2道)或不加LPA(1道)处理。细胞裂解物用抗活性Gα13单克l隆抗l体(Cat)孵育。#26902)(顶面板)。这个用抗Gα13兔多克l隆抗l体(Cat)免l疫印迹法检测沉淀活性Gα13#21005年)。底部的面板显示了用抗Gα13的细胞裂解物的Western blot(5%在顶部面板中使用的)。
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