Arf6-GTP***团队在线服务“本信息长期有效”

武汉纽斯特生物科技有限公司（WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd），系美国生命科学***供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域，主要产品有小分子、ELISA***盒、蛋白等，与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和***等客户建立了长期稳定的合作关系，产品销往***。

NewEast Biosciences Arf6激l活检测***盒基于特定于配置的单克l隆抗l体和Arf6特异性兔多克l隆抗l体，该抗l体特异性识别Arf6-GTP，但不能识别Arf6-GDP。 鉴于单克l隆抗l体对其抗原的高度亲和力，可以在短时间内进行激l活测定。 该测定法可提供可靠的结果，并具有一致的可重复性。

1. VASP通过调节Rab11依赖性TGF-β受体的质膜靶向来促进肝星状细胞的TGF-β活化

    肝l病学第61卷，首1期，第361-374页，2015年1月

2. Rab5活性调节GLUT4分类为胰岛素反应性和非胰岛素反应性内体室：胰岛素抵抗发展的潜在机制。

    内分l泌学。 2014年9月; 155（9）：3315-28

将裂解液转移到适当大小的试管中，并置于冰上。

如果发生核裂解，则细胞裂解液可能变得非常粘稠，难以移液。 如果发生这种情况，可将裂解液通过27?号***l器针头3-4次以剪切***组DNA。

通过离心10分钟（在4°C下为12,000 x g）清除裂解物。

收集上清液并将样品保存在冰上以备立即使用，或速冻并保存在-70°C以便将来使用。

检测原理

    武汉纽斯特生物技术有限公司的Cd***2活性检测***盒主要是利用识别蛋白特异形态的Cd***2-GTP单克l隆抗l体特异性的去检测细胞提取物或者体外的（样品需要进行GTPγS活化处理）活性Cd***2-GTP的水平。简言之，特异性识别Cd***2活化构象的鼠单克l隆抗l体可以特异性结合细胞裂解液中的Cd***2-GTP活性蛋白，然后利用protein A/G将抗原抗l体的结合物吸附下来，再利用特异性识别Cd***2活化构象的兔多克l隆抗l体进行免l疫印迹分析进行检测。

***制备

1X Assay/Lysis Buffer：实验前用去离子水将5X的Assay/Lysis缓冲液稀释成1X的缓冲液，并在使用前加入蛋白酶***l剂如1 mM PMSF, 10 μg/mL leupeptin（亮肽素），或 10 μg/mL aprotinin（抑肽酶）。

样品处理

贴壁细胞

1. 培养细胞密度达到大约80%-90%之间（直径10 cm培养皿，~107个细胞），并用活性剂或***l剂进行处理。

2. 吸去培养基并用冰冷的PBS洗涤两次。

3. 向细胞中加入1X Assay/Lysis缓冲液（每个直径10cm的***培养皿中加入0.5-1mL）。

4. 将培养皿放置于冰上处理10-20分钟。

5. 用细胞刮棒把细胞从培养皿下分离下来。

6. 将细胞裂解物转入合适的管中并放置于冰上。

7. 如果核发生裂解，细胞裂解物可能会变得非常的粘稠并且难以吸取。当这种情况出现时，将细胞裂解物用27?的***l器针头来回吸取3-4次，以******组DNA，从而避免上述情况的出现。

8. 4°C 12000 g, 离心10 min。

9. 收集上清（~1-2 mg总蛋白）并放置于冰上使用。如果样品不立即使用，请将处理后的样品存放于-70°C条件下。